仓昌硕ELISA试剂盒：用户共享实操教化与手段

发布日期：2024-12-08 14:34    点击次数：131

实验前准备

仔细阅读施展书：ELISA 试剂盒的种类弥远，不同倡导的检测限度及实验方法不尽交流，即使是消亡倡导，不同厂家的试剂盒在具体操作表情和试剂使用上也可能存在互异。因此，在使用仓昌硕 ELISA 试剂盒前，务必仔细阅读施展书，熟谙实验旨趣、操作经由、试剂配制方法、提防事项等关节信息，严格按照施展书的要求进行操作，以确保实验的准确性和可靠性。查验试剂盒与仪器成立：证明试剂盒的称呼、规格、批号等信息是否与实验需求相符，并查验试剂盒内各试剂的外不雅、性状是否平日，有无变质、变色、千里淀等极度情况。同期，准备好所需的仪器成立，如酶标仪、洗板机、移液器等，并确保其性能平日、校准准确。

样本处置

样本采集与保存：采集样本时要提防幸免溶血、脂血等情况，以免影响实验驱散。采集后的样本若弗成实时检测，应左证样本类型和检测倡导的要求进行妥善保存，一般来说，血清或血浆样本可在 - 20℃或 - 80℃下保存，但要幸免反复冻融。样本稀释：左证样本中待测物资的浓度和试剂盒的检测限度，对样本进行妥当稀释。稀释过程中要使用试剂盒配套的样本稀释液，并准确吸取样本和稀释液，充分混匀。同期，提出对样本进行梯度稀释，以细则最好的稀释倍数，提升检测驱散的准确性。

加样操作

聘用合适的移液器：左证加样量的大小聘用量程合适的移液器，并在使用前查验移液器的准确性和精密度，确保加样量准确无误。吸取液体时，速率不宜过快，以免产不满泡，影响加样量的准确性。加样手段：加样时应将移液器垂直加入反映孔中，幸免刮擦包被板底部，凝视梗阻包被层。同期，要提防幸免液体外溅，若有血清残留在反映孔壁上，应实时用吸水纸吸干，以免影响实验驱散。加样纪律要严格按照施展书的要求进行，不可自便鼎新。

孵育过程

适度孵育条目：按照试剂盒施展书的要求，将加好样的酶标板放入恒温孵育箱中进行孵育，孵育温度和技能要准确适度，一般来说，孵育温度为 37℃，孵育技能左证不同的试剂盒和检测倡导而有所不同，雷同在 1-2 小时之间。孵育过程中要保合手孵育箱内温度均匀安详，幸免温度波动对实验驱散产生影响。凝视挥发：为凝视孵育过程中反映孔内的液体挥发，可在酶标板上加盖或使用封板膜密封，但要提防封板膜只限一次性使用，以幸免交叉欺侮。

洗板操作

聘用合适的洗板模式：洗板模式可分为手工洗板和机器洗板两种，可左证推行情况聘用合适的洗板模式。若采纳手工洗板，要提防每次加入洗涤液后应静置 15-30 秒，使洗涤液充分与反映孔内的物资聚首，然后轻轻罢休洗涤液，再将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干，幸免残留的洗涤液对后续实验产生影响。若使用洗板机洗板，则要提前成立好洗板机的参数，如洗涤次数、洗涤液体积、浸泡技能等，确保洗板后果。确保洗涤充分：洗涤是 ELISA 实验中十分关节的一步，洗涤不充分会导致非特异性聚首，从而影响实验驱散的准确性。因此，在洗板过程中要确保每孔皆加满洗涤液，凝视孔口有游离酶残留，同期要提防幸免洗液在孔间窜流，形成孔间欺侮。

显色与比色

显色操作：加入显色剂后，要提防显色技能和温度的适度，一般在室温下避显豁色 10-30 分钟，具体技能可左证试剂盒的施展书和实验教化进行调整。显色过程中要幸免阳光直射和剧烈转动，以免影响显色后果。比色测定：显色达成后，应立即使用酶标仪进行比色测定，读取各反映孔的吸光度值。比色时要提防聘用合适的波长，一般 ELISA 试剂盒常用的波长为 450nm 或 492nm，具体波长可左证试剂盒的施展书和显色剂的种类进行聘用。

质料适度

成立方法弧线和空缺对照：每次实验皆应成立方法弧线和空缺对照，方法弧线用于定量分析样品中待测物资的浓度，空缺对照用于扣除配景值，提升实验驱散的准确性。方法品的浓度应涵盖试剂盒的检测限度，并按照一定的梯度进行稀释，同期要提防方法品的保存条目和使用期限。重叠实验：为了确保实验驱散的可靠性，提出对样品进行重叠实验，一般每个样品可成立 2-3 个复孔，计较复孔之间的平均值和方法差，若复孔之间的互异较大，应分析原因并再行进行实验。驱散考据：如若对实验驱散有疑问，可使用其他检测方法对样品进行考据，如 Western blotting、免疫荧光等，以确保实验驱散的准确性。